根癌农杆菌Ti质粒上的T-DNA片段可在Vir毒蛋白下，自主切割、转移并整合至植物基因组。科研中已去除Ti质粒的致瘤基因，改造为安全的二元载体、超二元载体或三元载体系统，将目的基因插入T-DNA区域，借助农杆菌侵染实现外源基因的定向递送与整合。常用农杆菌菌株包括EHA105、AGL-1、LBA4404等，适配玉米幼胚侵染体系。主要以玉米未成熟合子胚（IZEs）为受体，该材料分裂能力强、再生；近年也开发出成熟种子胚外植体转化体系，可规避幼胚取材受生育期限制的问题，实现周年转化。抗性筛选与植株再生共培养结束后，芒果组培，将幼胚转移至含筛选压力的培养基上，分批筛选抗性愈伤组织，淘汰未转化的阴性细胞；将阳性抗性愈伤转入分化培养基，诱导芽体分化，再转入生根培养基培育完整幼苗；炼苗后移栽至温室培养，获得T0代植株。分子鉴定与纯合株系筛选对T0代植株提取DNA，通过PCR、Southern杂交检测外源基因整合情况，通过RT-PCR、Westernblot检测基因表达水平；收获T1代种子后，连续多代自交，结合分子检测筛选获得遗传稳定的纯合株系。分化成苗状态优良的阳性愈伤转入分化培养基，光照培养。7–10天陆续出现绿色芽点，2–3周分化出完整小苗。同一愈伤丛生苗过多时，需适当疏苗，避免养分不足导致弱苗、死苗。第六步：生根与炼苗移栽幼苗长至3–5cm、具有2片真叶时，单株切下转入生根培养基。待根系浓密、植株健壮后，开盖室内炼苗3–5天，清洗根部残留琼脂，移栽至营养土，温室常规管理。四、粳稻与籼稻组培差异及优化方案1.粳稻（常规模式材料）愈伤诱导率高、胚性好、褐化率低、分化再生稳定，采用标准体系即可获得高转化效率，组培难度低、重复性好。芒果组培-武汉贝科新肽科技公司由武汉贝科新肽科技有限公司提供。武汉贝科新肽科技有限公司为客户提供“原位杂交,亚细胞定位,蛋白互作,启动子筛选”等业务，公司拥有“原位杂交,亚细胞定位,蛋白互作,启动子筛选”等品牌，专注于化学试剂等行业。，在武汉市洪山区雄楚大道339号林业局林木种苗管理总站科技楼6楼606的名声不错。欢迎来电垂询，联系人：夏先生。)