胞外囊泡NTA技术服务-科锐诺生物
样本准备1.提供外泌体悬液即可,未纯化样本也可以上机检测;注意:NTA仅提供粒径分布情况和颗粒浓度,无法区分外泌体与非外泌体成分;当然也可先利用外泌体特异性标记物进行荧光标记,则可以获知外泌体特定亚群的含量。2.仪器的检测区间是10^7particles/ml,且有浓度检测下限,为10^5particles/ml,进样量不少于2ml;一般来说,会对样本稀释后进样;我司无法准确建议送样量;检测需要量与样本本身浓度有关,样本浓,则用量小,反之则多,根据检测经验,样本取用量一般在2μl-100μl不等,取用量大于50μl时大多由于样本分泌量过低、提取失败或者对样本有过多稀释。一般建议送样量不低于30μl,如样本珍贵,可联系我司寄回,运费视具体情况收取。iTRAQ(isobarictagsforrelativeandabsolutequantitation,同位素标记相对和绝1对定量)是由ABSCIEX公司研发的一种体外同重同位素标记的相对与绝1对定量技术。该技术使用8种(或4种)不同的同位素试剂来同时标记和比较8种(或4种)不同的蛋白质样品。这些试剂由3个不同的化学标签组成:报告部分,肽反应部分和平衡部分。报告部分为客户可按需选择标记个数,肽反应基团将iTRAQ标签与肽段的N-端基团和每个赖氨酸侧链相连,可标记所有酶解肽段,平衡部位可保证iTRAQ试剂标记的不同样本的同一肽段具有相同的质荷比,因此改变任一iTRAQ试剂,不同同位素在标记同一多肽后在一级质谱检测,分子量都完全相同。而在串联质谱中,同重元素标记肽段平衡基团在二级质谱发生中性丢失。信号离子表现为不同质荷比的峰,因此,根据波峰的高度及面积,可以得到蛋白质的定量信息。外泌体介导细胞间的信号交流,胞外囊泡NTA技术服务,是目前外泌体研究中十分热门的领域。外泌体中有丰富RNA以及蛋白,其中RNA的种类包括miRNA,LncRNA,mRNA等[1]。大量文献报道,这些RNA在细胞间的相互交流中发挥着巨大的作用。如,外泌体中miRNA可以调节下游细胞对胰岛素的敏感性。在研究中,作者培养脂肪组织巨噬细胞(ATM),并收集培养基中富含miR-155的外泌体,作用于下游的脂肪细胞和肌细胞。miR-155可以结合Argonaut蛋白,并募集下游的目标mRNA,从而影响细胞对胰岛素的敏感性和对葡萄糖的耐受性[2]。此外,外泌体中的LncRNA可以调控下游细胞的转录水平[3],mRNA、蛋白等可以通过外泌体转运至下游细胞,并在胞内进行翻译胞外囊泡NTA技术服务-科锐诺生物由武汉科锐诺生物科技有限公司提供。行路致远,砥砺前行。武汉科锐诺生物科技有限公司致力成为与您共赢、共生、共同前行的战略伙伴,更矢志成为技术合作具有竞争力的企业,与您一起飞跃,共同成功!)
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